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100T/96S 糖酵解系列果糖1,6二磷酸醛縮酶(FBA)測(cè)試盒

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糖酵解系列果糖1,6二磷酸醛縮酶(FBA)測(cè)試盒

產(chǎn)品規(guī)格 : 100T/96S

測(cè)試方法:微量法

產(chǎn)品分類:糖酵解系列

產(chǎn)品品牌:mlBio/酶聯(lián)生物

產(chǎn)品包裝:液體盒裝

運(yùn)輸條件:快遞包郵

應(yīng)用范圍:僅供科研研究使用

保存條件:低溫避光保存

有效期:6個(gè)月

說(shuō)明書 : 咨詢或電詢客服索取

供應(yīng)商:上海酶聯(lián)生物科技有限公司

注    意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。


糖酵解系列果糖1,6二磷酸醛縮酶(FBA)測(cè)試盒

測(cè)定意義:

植物葉綠體中果糖 1,6-二磷酸醛縮酶是光合作用中參與 calvin 循環(huán)的重要酶。催化果糖 1,6-二磷酸和景天庚酮糖 1,7-二磷酸的合成反應(yīng),在各種逆境脅迫下表現(xiàn)不同的響應(yīng)。

測(cè)定原理:

果糖 1,6-二磷酸醛縮酶催化果糖 1,6-二磷酸生成 3-磷酸甘油醛和磷酸二羥丙酮,在磷酸丙糖異構(gòu)酶和 α-磷酸甘油脫氫酶作用下催化NADH和磷酸二羥丙酮生成NAD和α-磷酸甘油,340nm 處吸光值的變化可反映果糖 1,6-二磷酸醛縮酶活性的高低。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:

天平、震蕩儀、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板。


樣本的前處理:

①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。

②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。

建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。

 


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