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100管/96樣 氧化磷酸化系列/NADH輔酶Q測試盒/(微量法)

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氧化磷酸化系列/NADH輔酶Q測試盒/(微量法)

產(chǎn)品規(guī)格 : 100管/96樣

測試方法:微量法

產(chǎn)品分類:氧化磷酸化系列

產(chǎn)品品牌:mlBio/酶聯(lián)生物

產(chǎn)品包裝:液體盒裝

運輸條件:快遞包郵

應(yīng)用范圍:僅供科研研究使用

保存條件:低溫避光保存

有效期:6個月

說明書 : 咨詢或電詢客服索取

供應(yīng)商:上海酶聯(lián)生物科技有限公司

注    意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。


氧化磷酸化系列/NADH輔酶Q測試盒/(微量法)

測定意義:
復(fù)合體Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又稱NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶,廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞的線粒體中,是線粒體內(nèi)膜中 的蛋白復(fù)合物。該酶催化一對電子從NADH傳遞給CoQ,同時可使O2還原生成O2.-,是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2.-的主要部位。測定該酶活性,不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈(ETC)狀態(tài),而且可以反映活性氧(ROS)生成狀態(tài)。
測定原理:
復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+,在340nm下測定NADH的氧化速率計算出該酶活性的大小。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
樣本的前處理:
組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
①準確稱取0.1g組織或收集500萬細胞,加入1mL試劑一和10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。
②將勻漿600g,4℃離心5min。
③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
④上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測定從線粒體泄漏的復(fù)合體Ⅰ(此步可選做)。
⑤步驟④中的沉淀即為線粒體,加入200uL試劑二和2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10秒,重復(fù)30次),用于復(fù)合體Ⅰ酶活性測定。



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上海酶聯(lián)生物科技有限公司

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電話:021-54222852

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